PCR技術(shù)是在體外人工復(fù)制DNA序列的一種方法,它是一項(xiàng)重要的分子生物學(xué)技術(shù),并廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究,醫(yī)學(xué)診斷等領(lǐng)域。PCR板是PCR反應(yīng)時(shí)進(jìn)行反應(yīng)的試管架,常見的PCR板有96孔板和384孔板。本文將從PCR板使用前準(zhǔn)備,PCR反應(yīng)的制備等方面講解PCR板的使用方法。
1、準(zhǔn)備PCR反應(yīng)體系:PCR反應(yīng)體系是PCR反應(yīng)核心,其成份不同,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇。通常包括模板DNA、引物、TaqDNA聚合酶、dNTPs等。做反應(yīng)體系應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)要求。
2、熟悉PCR板類型:通常有96孔板和384孔板等,需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇不同的類型。為達(dá)到更好效果,要選擇質(zhì)量更好的PCR板。
3、準(zhǔn)備PCR板:一般情況下,需要將PCR板放置在洗滌劑中清洗一下,并以96孔板為例,在洗滌后將其平放在樣品塊上,輕輕拍平即可準(zhǔn)備好使用。
進(jìn)口PCR板的使用方法:
1、添加物質(zhì)到PCR板:將準(zhǔn)備好的反應(yīng)物質(zhì)依次加入PCR板中,最后加入H2O混合均勻。注意反應(yīng)混合液蒸發(fā),加入少量礦物油保持親水性。
2、查看PCR板是否密封:為防止反應(yīng)液蒸發(fā)和污染,必須保持PCR板嚴(yán)密密封。如果使用透明蓋子,可以透過蓋子查看PCR板是否密封。
3、設(shè)置PCR反應(yīng)程序:根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置PCR反應(yīng)程序,包括溫度、時(shí)間、控制PCR板熱蓋的開合等參數(shù)。合理的PCR反應(yīng)程序有利于提高PCR反應(yīng)質(zhì)量。